上海复祥生物ATCC细胞传代方法

  ATCC细胞传代方法：
  收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
  （一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
  (二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
  1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
  2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
  3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。
  注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

  冻存方法： 冻存液：95%完全培养液，5%DMSO
  储存：液氮储存